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巨球百合胚性愈伤组织状态的调整及植株再生

作者: amvip
来源: uumtu
日期: 2018-11-19 17:20
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第一章文献综述?1百合概述百合是百合科(Liliaceae)百合属(IMhim )所有种、亚种、变种、变型和品种的统称,是以观花为主的具有重要商业价值的球根花弁(杜方,2014)。百合(Liliumspp.)有“球根花弁之王”的美誉,由于其品种极其丰富、花型独特、花色纯正、适应性强、栽培管理技术成熟,加之种球交流便利,广泛应用于切花、盆花生产,消费量逐年攀升,近年来成为世界五大鲜切花之一(Nakatsuka等,2003;夏宜平等,2005 )。除了观赏价值外,许多百合缕蓋还可供食用和药用,如卷丹百合(L. lancifolium、、宜昌百合(L. Leucanthtm Baker)和野百合、L. brownii )等(浙江植物志编辑委员会,1993;龙雅宜等,1998;陈俊愉,2000;傅书遐,2002;张延龙等,2004;江雪梅等,2006;孙安妮等,2011)。百合属包含大约100种植物,原产北美洲、欧洲和亚洲(Haw, 1986; Beattie和White, 1993; Rong等,2011 ),从北绵63。的俄罗斯勘察加半岛(i:. tenuifolium和 L. medeoloides )至北讳 11° 的印度南部L. neilgherrense )均有分布(Rees,1992)。其中,中国有47种(龙雅宜等,1998),日本有16?20种,韩国有14个种(Shimizu 1987; Kim, 1996; Rhee 等,2005; Sultana, 2011)。大约 25 个种起源于此美,约12个种起源于欧洲(Rina等,2012)。中国是全球的百合分布中心,主要起源于中国西南山区和喜马拉雅山脉(Hayashi和Kawano, 2000 ),野生资源十分丰富,包括47种18个变种,其中包含我国特有种36个,变种15个,约占世界百合属植物的一半(汪发瓒等,1980;王连英,1988 )。各省均有分布,以四川西部、云南西北部和西藏东南部分布最多,约36种;其次是陕西南部、甘肃南部、湖北西部和河南西部,约13种;再次是东;三省吉林、宁和黑龙江,约8种(中国科学院中国植物志编委会,1959-2004;陈俊愉,2000;张玲,2007;杜方等,2014);山西省有记载并有实物的有5种(杜方等,2005 );浙江省有3个种,4个变种(孙哓杰等,2008 )?!?.?1.2百合的分类百合的分类一直存在争议,Comber ( 1949)根据15种表型特征,提出了最为综合权威的分类。而vanTuyl等(2011 )在Comber ( 1949 )的基础上,在综合前人多方面的研究结果(Comber, 1949; De Jong, 1974; Nishikawa, 2007; Lim等,2008 ),提出百合属野生种可分为7个组(Section) : Martagon, PseudoliriunuLilium, Archelirion, Sinomartagon, Leucolirion 和 Oxypetalum。其中,Martagon、Sinomartagon、Leucolirion 和 Oxypetalum 组在我国有较多分布,而Pseudolirium组主要分布在北美洲,尤其是美国西海岸,Archelirion组主要分布于曰本,少量分布于中国南方(含台湾),主要分布于欧洲和中东(McRae, 1998; vanTuyl 等,2011)。百合的园艺新品种正以每年300个的速度增加,己注册的百合品种有上万个(vanTuyl等,2011)。根据英国皇家园艺学会(2009 )分类标准,百合属种和品种可分为9个区群,分别为亚洲百合杂种系(Asiatic hybrids,简称A)(区群I)、头巾(星叶)百合杂种系(Martagonhybrids,A)(区群II)、欧洲纯白百合杂种系(Euro-Caucasian hybrids, C )(区群 III )、美洲百合杂种系(American hybrids, A)(区群rV )、麝香百合杂种系(Longiflomm lilies, L)(区群V)、响形和奥列莲百合杂种系(Trumpet and Aurelian hybrids, T )(区群VI)、东方百合杂种系(Orientalhybrids, 0)(区群VII)、其他杂种系(Other hybrids,如铁东百合杂种系LO、铁亚百合杂种系LA、东亚百合杂种系OA、东味百合杂种系0T等)(区群VIII)和原种或栽培变种(Species and cultivars of species )(区群 IX )?!??第二章野生百合髙效再生体系的建立?1四种野生百合无菌播种的研究巨球百合、宜昌百合(/<. leucanthum Baker)、艳红鹿子百合(L. speciosum Thumb,van gloriosoides Baker )和野百合均为百合属、Lilium、多年生球根花弁(浙江植物志,1993 )。巨球百合和野百合在第一章中已有详细介绍;艳红鹿子百合为合湾独有的稀有植物,是鹿子百合(Z^. Thunb.)(产于曰本)的变种,大型白色花朵点缀艳红色斑点,十分美丽(浙江植物志编辑委员会,1993; Chang等,2000;张正,2004);宜昌百合花白色,里面淡黄色,有微香,其缕蓋有镇痛和消炎拔毒之功效(傅书遐,2002)。4种百合均为我国特有种,花可作观赏用,大多錄宴可供食用和药用,是百合育种的优良基因材料,具有较高的研究和开发利用价值,但资源珍稀,属需?;さ南∮幸吧种首试矗ㄕ憬参镏?,1993;龙雅宜等,1998;Chang等,2000;陈俊愉,2000;夏宜平等,2001;傅书遐,2002;张正,2004;张延龙等,2004;江雪梅等,2006;李根有等,2007;孙安妮等,2011;吴的等,2014),因此其种子无菌播种的研究具有理论和实践意义?!?.?1.2结果与分析无菌播种45d后,发现野百合种子污染率很高,约达50%,且野百合和宜昌百合种子几乎无一萌发。因此,统计90d时此2种百合的萌发率、诱导率及诱导芽数等??济确⑹奔渖?,大部分剥皮处理种子的开始萌发时间早于不剥皮处理;萌发率上,大部分剥皮处理种子的萌发率高于不剥皮处理(表2.3)。本试验结果表明,剥皮处理对提高2种百合种子的萌发速度和萌发率有一定的效果。但不剥皮处理的巨球百合种子亦具备较高的萌发率,说明巨球百合种子具有较强的生活力,是优良的百合种质资源。诱导芽数上,不同编号培养基之间并无显著差异(表2.3和表2.4 )。将以上生长45天后的巨球百合种子转接至空白培养基中,发现生长45天后,原不同编号培养基在相同生长环境中开始表现出差异(表2.5),3号培养基小鳞蓋个数达3.57个(图2.1),显著高于其它处理。有同类研究表明,这可能与所添加的激素在材料上的滞留有关,从而延续地表现在其整个植株生长过程中(吴的等,2013)。许智宏等(1978 )也在烟草叶组织培养中发现,细胞分裂素对叶组织的作用时间仅需5?6天,随后将其移到MS培养基上,均能正常形成芽,并促进蓋叶及根的形成?!?.?第三章巨球百合胚性愈伤组织状态的调整及植株再生........ 281材料与方法........ 282结果与分析........ 312.1胚性愈伤组织的诱导与增殖........ 313 讨论 ........39第四章外源植物生长调节剂对巨球........411材料与方法........ 412结果与分析........ 433讨论........ 46第五章结论与展望........ 481主要研究结论........ 482主要创新点........ 493不足与研究展望........ 49?第四章外源植物生长调节刑对巨球百合愈伤组织内源激素水平影响的初步研究?植物生长调节物质是培养基中的关键物质,虽然用量很少,但起着很重要和明显的调节作用。目前常用的外源生长调节物质主要有生长素类(2, 4-D、NAA、ffiA和IAA等)、细胞分裂素类(TDZ、KT、6-BA和ZR等)、赤霉素类(GAs )、脱落酸(ABA)和多效唾(PP333 )(刘庆昌等,2003 )。植物内源激素是由植物次生代谢产生,在极低浓度下就有明显生理效应的一类微量有机物质。传统植物内源激素主要分为五大类,即生长素类(AUXs)、赤霉素类(GAs)、细胞分裂素类(CTKs)、脱落酸(ABA)和乙?。‥th )。随着分析技术的进步,新的植物内源激素还在不断被发现,如多胺、水杨酸类、油菜素内酷和茉莉酸等(谈锋,1986;王忠,1999;李素梅等,2003;李雨薇等,2007;Pan 等,2009;文静等,2014)。在植物愈伤组织培养中,外源激素起着传递遗传物质的脱分化、再分化等发育信号的作用。外源激素通过影响植物内源激素发挥作用,其作用效果与外植体以及愈伤组织本身内源激素的种类和水平有密切关系(何道一等,1992;陈以峰等,1998;邢登辉等,1999;肖关丽等,2003;刘清等,2007)。因此,探讨巨球百合愈伤组织培养过程中各内外源激素变化规律及互作关系,可为其胚性愈伤组织状态调整有针对性地使用外源生长调节物质提供依据?!??结论?本研究以百合属野生百合种质资源为研究材料,通过无菌播种和鳞片诱导小鳞蓋等技术手段建立了百合高效再生体系;并以浙江省分布的巨球百合为材料,进行了愈伤组织诱导、胚性愈伤组织状态的调整及植株再生等研究,初步探讨了愈伤组织培养中内外源激素的相互效应,以期为百合属植物野生种质资源的保存和高效繁育,以及利用优异野生百合材料构建遗传转化体系提供实验依据,主要结论如下:1、剥皮处理对提高野生百合种子的萌发速度和萌发率有一定的效果。剥皮处理下,巨球百合和宜昌百合种子萌发的最适培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA,艳红鹿子百合为MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA,该培养基能有效提高种子萌发率和诱导率,所形成的植株健壮,生长速度快。巨球百合的种子生活力和萌发性强,适合无菌播种繁殖,是优良的野生百合种质资源。2、巨球百合、药百合和卷丹百合的鳞片诱导小鳞签的最适培养基为MS+l.Omg/L 6-BA +1.0mg/L NAA、MS 和 MS+1.0~2.0mg/L 6-BA +0.1-1.0 mg/LNAA,能有效促使鳞片诱导小鳞蓋,所形成的小鳞蓋个数多,生长健壮。其中,巨球百合鱗片诱导小麟蓋与无菌播种的最适培养基配方相同。3、在叶片、叶柄和小鳞签3种外植体中,巨球百合胚性愈伤诱导的最适外植体为叶片,对应叶片诱导愈伤的最适诱导培养基为MS+0.4mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+1.0mg/L2,4-D+30g/L慮糖+8g/L琼脂,该培养基愈伤诱导率达92.50%,外植体褐化率仅为5.00%,且诱导出的愈伤多数为胚性愈伤组织。由此证明巨球百合是诱导胚性愈伤组织的优良材料。............参考文献(略)?

2018年农业硕士论文范文精选篇三

?第 1 章 绪 论?1.1 立题依据1978年11月24日晚,安徽省凤阳县的18名农民制定了家庭联产承包责任制,在当时的历史背景下这算得上是一个惊人的壮举,这也可以算作是我国农村土地改革的开篇。改革开放之后,我国确立了以家庭联产承包责任制为主的农村基本经营制度。进入 20 世纪 90 年代后, 家庭联产承包责任制的弊端逐步显现出来,农村土地问题日益突显。大多数农民通过农业生产所获得的收益不再增加,探索出适合现代社会的土地经营模式已经箭在弦上了。而进行农村土地流转可将农户个人土地集中为大面积连片土地,化点为面。在种植与收割阶段,不但便于统一管理还有利于发挥农业科技优势,真正做到与时俱进,达到降低农业生产成本和提高农户收益的双赢目标。自 1984 年中央 1 号文件首次提出允许农户经集体同意可以转包承包地给种田能手,到 2002 年颁布的《农村土地承包法》把土地承包经营权流转政策上升为法律规定。再到十七届三中全会做出的《中共中央关于推进农村改革发展若干重大问题的决定》明确指出:“加强土地承包经营权流转管理和服务,建立健全土地承包经营权流转市场,按照依法自愿有偿原则,允许农民以转包、出租、互换、转让、股份合作等形式流转土地承包经营权,发展多种形式的适度规模经营?!?013年中央一号文件对农村土地流转做出了更加具体地指示,文件指出要稳定农村土地承包关系。抓紧研究现有土地承包关系保持稳定并长久不变的具体实现形式,完善相关法律制度。坚持依法自愿有偿原则,引导农村土地承包经营权有序流转,鼓励和支持承包土地向专业大户、家庭农场、农民合作社流转,发展多种形式的适度规模经营。结合农田基本建设,鼓励农民采取互利互换方式,解决承包地块细碎化问题。土地流转不得搞强迫命令,确保不损害农民权益、不改变土地用途、不破坏农业综合生产能力??杉持醒攵耘┐逋恋亓髯侍獾闹厥映潭??!?1.2 国内外研究现状农村土地流转问题并不是一个新的研究课题,学者们对一些焦点问题所持的观点也不尽相同。国内学者更多的关注农村土地流转的现状把握和制约因素分析。主要研究方向可以归纳总结为以下四个方面,即关于农村土地流转现状的研究、关于农村土地流转动因的研究、关于农村土地流转缓慢原因的研究,以及关于农村土地流转绩效的研究。王春超(2011)从农民家庭经济资源结构的方向系统研究了影响中国农户收入增长的关键因素,试图解决我国农民收入增长速度低于城市居民,以及农民收入增长后劲乏力的问题。研究得出了这样的结论,要想提高农民对土地的利用率,以及农民在土地市场中参与的程度,必须通过政府出台相关的鼓励政策,这样才会提高农民的收入。刘莉君、岳意定(2010)在构建农村土地流转绩效评价指标体系的基础上,对转包、反租倒包、股份合作制等我国目前主要采用的农村土地流转模式的经济指标进行对比分析,总结出股份合作制这种土地流转模式给农民带来的收益最多。游和远(2010)选取了我国 30 个省份的数据为研究对象。通过研究分析得到了如下结论:现阶段还没有证据证明农村流转与外部条件是否存在关联。农村土地流转并不会让农村劳动力发生转移,失去土地在家留守也是农民流转农村土地流转后可能的劳动力走向。促进农村土地流转还需要寻找并完善辅助农地流转制度安排目标实现的工具?!?.?第 2 章 相关概念界定与基础理论?2.1 农村土地流转概念界定农村土地流转是农村家庭所承包的土地通过合法的形式,保留承包权,将使用权转让给其他农户或其他经济组织的行为。农村土地流转从根本上说是当农村经济发展到一定程度时,农民为获得更多的收益所产生的一种自发行为。目前我国施行的农村土地流转方式是以农户自愿为基础。通过转包、转换、入股、联营、租赁等多种方式出让其使用权,在乡级土地相关管理部门备案后,签订农村土地流转合同。简单的来说就是在承包期的农业用地以不改变土地的用途为原则,倡导农民将拥有承包权的土地向农业大户,农村合作社,农业企业等流转,建立起以农村土地为核心的合作机制?;竦猛恋厥褂萌ǖ呐┮荡蠡?,合作社和农业企业通过引进先进的经营模式和管理制度,将土地集中起来,开展大规模集约化、机械化、现代化的农业种植及经营。而另一部分将土地使用权承包出去的农民,在获得土地流转收益后,可以没有后顾之忧的投身到二、三产业中,为祖国的建设添砖加瓦?!??2.2 相关基础理论地租是劳动者因为使用土地而向土地拥有者支付的实物形态和货币形态的租金或者土地拥有者出租土地的报酬。也可以说地租是直接参与生产的劳动者在生产过程中所创造的那部分超额价值被土地所有者无条件拥有的部分,它是占有土地权利和经营土地方式分离产生的必然结果。地租的本质就是土地拥有者凭借土地拥有权获得的收益,即土地所有者从土地上获取收益的权利。马克思认为:“不论地租有什么独特的形式,它的一切类型都有一个共同的特点:地租的占有是土地借以实现的经济形式”。农户利用土地的方式对地租没有影响,只要存在追求利益的组织或个人,产生了土地的垄断,就有地租的存在。在数量上的对比说明,农户利用土地的方式与土地拥有者出租的土地数量息息相关,农户从土地不同的用途获得的收益是不同的。效益好的话,他们按自己的意愿扩大租用土地,反之就会减少土地的耕种和使用面积。这一系列的变化都会对社会经济的发展产生影响。地租按照条件的形成原因不同,可以分为级差地租、绝对地租和垄断地租。级差地租理论认为,地租存在有两个必要的条件:一是土地的有限性,二是土地在肥沃程度和位置上的差异。等量投资的劳动生产率在不同肥力和位置的土地上就不一样,因而人们尽可能选择产出高品质的土地优先进行播种,随着人口大量的增加,使得在劣等土地上产出的农产品也能售出。在优等土地耕作获得的平均利润超出劣等土地所得平均利润的部分就是超额利润,即级差地租。17 世纪的重商主义学家威廉?配第的《赋税与捐赠论》中的观点为后来马克思提出的级差地租理论奠定基础。马克思把资本主义条件下的级差地租分为两类:级差地租Ⅰ和级差地租Ⅱ。Ⅰ类是指相同的资本量和劳动力,在大小相同位置不同且养分不等的土地上,所产生的超额利润是有很大不同的,因而支付的地租也产生差异。Ⅱ类是在任何条件都相同的土地上,投入不等的资本量,产生不同的超额利润引起地租的不等。绝对地租是建立在土地所有者对土地的垄断地位所取得的地租,它产生的原因是由于土地私有权的存在,其实体是农产品的价值超过社会生产价格以上的那部分超额利润。绝对地租的本质就在于土地所有权的垄断。而垄断地租是由土地生产产品的价格垄断等因素带来的那部分超额利润而转化成的地租?!?


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